N6-methyladenosine (N6-甲基腺苷/m6A）是在腺苷（Adenosine）的第六位氮原子上添加一个甲基（-CH3）形成的修饰，广泛存在于多种生物的RNA分子中，是存在于所有高等真核生物中最普遍的信使 RNA （mRNA） 内部 （非帽） 修饰。它可以修饰病毒 RNA，并具有抗病毒活性。N6-methyladenosine抗体因其具有高特异性和高灵敏度，在表观转录组学、肿瘤学、神经科学和干细胞再生医学等领域具有广泛的应用价值。本文综述了N6-methyladenosine抗体的生物学功能、N6-methyladenosine抗体在科研和临床中的应用，并探讨了未来的研究方向。

m6A最初是20世纪70年代，Desrosiers.R等人在哺乳动物细胞发现的。但是对m6A的功能以及作用机制的研究却并不深入。直到m6A去甲基化酶FTO的发现，揭示了m6A修饰是可逆的。此后陆续发现了更多的m6A修饰相关酶，并对其作用机制进入了深入研究，研究表明m6A通过影响RNA的稳定性、翻译效率、剪接、核输出等过程，调控多种生物功能，如在胚胎发育、神经细胞发育、干细胞命运决定等重要生物过程中起关键作用。

m6A抗体是研究RNA表观修饰的核心工具，m6A 抗体的核心作用是通过免疫沉淀（如 m6A-seq 技术）富集含有 m6A 修饰的 RNA 片段，从而实现对全转录组 m6A 位点的高通量检测，是解析 m6A 表观转录组的关键工具。

▌ N6-methyladenosine抗体科研应用

• 神经退行性疾病

在神经退行性疾病中，m6A 抗体帮助发现 FTO 介导的 m6A 修饰异常可调控 β- 淀粉样蛋白前体蛋白（APP）的 mRNA 稳定性。结合m6A 免疫沉淀测序（MeRIP-seq） 技术，利用 m6A 抗体富集并测序含 m6A 修饰的 RNA，可在全转录组水平定位修饰位点，解析其对神经相关基因表达的调控机制。结合单细胞测序技术，可在单细胞水平分析不同神经细胞类型（如神经元、星形胶质细胞、小胶质细胞）的 m6A 修饰异质性。

• 代谢性疾病研究

m6A 修饰调控代谢相关基因的表达，影响糖脂代谢和器官功能。糖尿病：脂肪细胞中 m6A 修饰通过 YTHDF1 促进 GLUT4 mRNA 翻译，改善胰岛素敏感性；肥胖模型中 m6A 水平下降与胰岛素抵抗相关。非酒精性脂肪肝（NAFLD）：METTL3 介导的 m6A 修饰可增强 PPARγ mRNA 稳定性，促进脂肪生成；抑制 METTL3 可改善小鼠肝脂肪变性。

• 心血管疾病研究

心肌细胞凋亡与重塑：在心肌缺血模型中，m6A 修饰通过调节 Bcl-2 家族基因的 mRNA 稳定性来影响细胞凋亡；而 ALKBH5 去甲基酶的过表达能够减轻心肌损伤。

血管平滑肌细胞增殖：m6A 抗体检测揭示，在血管损伤后，m6A 修饰水平上升，通过 YTHDF2 促进增殖相关基因（例如 Cyclin D1）的 mRNA 降解减少，从而推动动脉粥样硬化的进程。

▌ N6-methyladenosine抗体的临床应用

• 肿瘤标志物开发组织

血液 m6A 水平检测：通过免疫组化（IHC）或 ELISA 技术，检测肿瘤组织中 m6A 整体修饰水平或关键调控酶（如 METTL3、FTO）的表达，辅助肿瘤分型：肝癌中高 m6A 水平与 METTL3 过表达相关，提示预后不良。淋巴瘤中 FTO 高表达导致 m6A 水平降低，与化疗耐药及复发风险增加相关。 

• 神经退行性疾病的生物标志物探索

脑脊液 / 脑组织 m6A 检测：阿尔茨海默病（AD）患者脑脊液中 m6A 修饰水平降低，与 Aβ 沉积及 Tau 蛋白磷酸化存在相关性。通过 m6A 抗体定位神经元中异常修饰的 mRNA（如 APP、PSEN1），辅助病理机制验证。

• 小分子化合物靶向 m6A 酶

甲基转移酶抑制剂：METTL3 抑制剂（如 STM2457、MI-503）可降低肿瘤细胞 m6A 水平，诱导细胞周期阻滞或凋亡，已在白血病、淋巴瘤动物模型中显示疗效。

去甲基酶抑制剂：FTO 抑制剂（如 MA2）可提高 m6A 修饰水平，抑制乳腺癌干细胞自我更新及转移能力。ALKBH5 抑制剂用于增强 T 细胞中 IFN-γ 的 mRNA 稳定性，提升肿瘤免疫治疗响应。

▌未来临床转化方面的探索

• 疾病诊断与生物标志物开发：液体活检的应用场景：通过分析血液、脑脊液或尿液中的m6A修饰RNA（例如外泌体RNA），开发非侵入性诊断工具。潜力疾病领域：癌症——肿瘤特有的m6A修饰模式（例如肺癌中METTL3介导的m6A增加）可能作为早期诊断的生物标志物。神经退行性疾病——阿尔茨海默病（AD）中m6A修饰的异常与tau蛋白的病理变化相关。代谢性疾病——肥胖或糖尿病中FTO调控的m6A动态变化。结合组织病理分型，使用m6A抗体的免疫组化（IHC）或原位杂交技术，量化肿瘤组织中的m6A水平，辅助癌症的分级（例如胶质瘤、乳腺癌）。

• 治疗靶点开发与药物筛选：针对m6A调控蛋白的小分子药物。抑制剂开发：FTO抑制剂——例如FB23-2在急性髓系白血病（AML）中通过抑制m6A去甲基化发挥抗肿瘤作用。METTL3抑制剂——例如STM2457可靶向依赖m6A的肿瘤（目前处于临床试验阶段）。抗体偶联药物（ADC）——利用m6A抗体靶向递送化疗药物至m6A高表达的癌细胞。RNA修饰调控疗法m6A修饰干预：通过寡核苷酸药物（例如ASO或siRNA）特异性调节疾病相关基因的m6A修饰水平。

▌参考文献

1.Desrosiers, R., et al. (1974)Identification of methylated nucleosides in messenger RNA from Novikoff hepatoma cells.PNAS,71(10), 3971-3975.

2.Jia, G., et al. (2011)N6-methyladenosine in nuclear RNA is a major substrate of the obesity-associated FTO.Nature Chemical Biology, 7(12), 885-887.

3.Dominissini, D., et al. (2012)Topology of the human and mouse m6A RNA methylomes revealed by m6A-seq.Nature, 485(7397), 201-206.

4.Li, M., et al. (2017)FTO plays an oncogenic role in acute myeloid leukemia as a N6-methyladenosine RNA demethylase.Cancer Cell, 31(1), 127-141.

5.Hess, M. E., et al. (2013)The fat mass and obesity associated gene (Fto) regulates activity of the dopaminergic midbrain circuitry.Nature Neuroscience, 16(8), 1042-1048.

6.Zhao, X., et al. (2014)FTO-dependent demethylation of N6-methyladenosine regulates mRNA splicing and is required for adipogenesis.Cell Research, 24(12), 1403-1419.

7.Zhong, X., et al. (2018)METTL3 regulates liver homeostasis and hepatocarcinogenesis via m6A-dependent mRNA stability.Nature Communications, 9, 5424.

8.Dorn, L. E., et al. (2019)The N6-methyladenosine mRNA methylase METTL3 controls cardiac homeostasis and hypertrophy.Circulation, 139(4), 533-545.

9.Mathiyalagan, P., et al. (2019)FTO-dependent m6A regulates vascular smooth muscle cell proliferation in atherosclerosis.Circulation Research, 124(5), 724-736.

10.Chen, M., et al. (2020)METTL3 promotes hepatocellular carcinoma progression through m6A-mediated stabilization of YAP1 mRNA.Nature Cell Biology, 22(6), 591-600.

11.Li, Z., et al. (2017)FTO promotes chemoresistance in lymphoma via m6A-dependent mRNA stabilization.Blood, 130(Suppl 1), 402.

12.Huang, Y., et al. (2019)Small-molecule targeting of oncogenic FTO demethylase in acute myeloid leukemia.Cancer Cell, 35(4), 677-691.

13.Yankova, E., et al. (2021)Small-molecule inhibition of METTL3 as a strategy against myeloid leukaemia.Nature, 593(7860), 597-601.